多肽固相合成常用的树脂及切割方法

固相多肽合成如今用到的主要有两种方式：BOC和FMOC。BOC方法合成过程中，必须频繁使用TFA脱BOC，并且在之后的从树脂上切割下去需要使用HF；FMOC方法反应条件平稳，在通常的实验环境下就能直接合成。以下是固相合成的常见概念。

固相合成比较常见的树脂

在固相合成中，树脂的材料一般是聚苯乙烯-二乙烯苯，尺寸为75-150μm，交联度为1-2%，目前所使用的交联度大部分为1%，因为在这样的交联度下，在DMF，DCM中，树脂有着良好的溶胀特性，自身在立体上成了一个空间网状结构，在树脂组织结构反应物分子可以自由自在的移动。

连接手腕一边用作反应位点，一边接入在树脂上，此为树脂中最重要的部分。2-Cl-Trt，Rink-Amide-MBHA，PAM，MBHA，Wang等都为当下普遍使用的树脂。当中，在BOC策略中使用PAM，MBHA，因为他们对酸的稳定性比较高，只能在在HF，TFMSA等强酸性环境下，才能成功把它们切割下来。

固相合成切割方法

结束固相合成之后，如果想要从树脂上把多肽切割下去，就需要选择合适的切割试剂，然后用冰乙醚沉淀，离心将沉淀采集，经过HPLC分离纯化，冷冻干燥以此获得产品。

氨基酸序列会由于使用的树脂不同而不同，所以在切割的时候，也要采用截然不同的切割方法。大多数选择的切割环境为酸性环境。一般采用HF切割PAM，MBHA树脂，在切割的时候需要将苯甲醚，对巯基苯酚，对甲苯酚等试剂加入其中。一般采用TFA切割Wang，Rink-Amide，Trt树脂，在切割过程中将三异丙基硅烷，苯酚，乙二硫醇，苯甲硫醚，水等加入。这种增添试剂关键用作碳正离子俘获试剂使用，从而对切割反应过程中产生的碳正离子展开俘获为目的，进而使这样的碳正离子对一些氨基酸侧链的攻击造成的不良反应能够减少。Trp，Tyr为相对易造成副反应的氨基酸，反应通常，是在常温环境下2h-4h，TFA/TIS/EDT/H2O（94/1/2.5/2.5），HF/p-cresol/p-thiocresol（90/5/5）为比较常见的切割配比，10-15ml/g树脂为常规的切割试剂使用量。

写到最后:

杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成业务:药物肽、临床肽、订书肽、淀粉肽、醛肽、环肽、二硫键搭桥多肽、穿膜肽、各种抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶联BSA和KLH抗原肽、各类酸修饰多肽、各种胺类化合物修饰多肽(苯胺、异戊胺、二乙胺)、各类荣光标记(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。

原创文章如有转载，请注明出处“本文首发于固拓多肽合成生物科技有限公司(www.gotopbio.com)”