多肽合成中最难的缩合方法—混合酸酐法

混合酸酐法是多肽合成缩合方法中最难最有效的方法之一，无机酸、有机酸都可用于形成混合酸酐，通常情况下，获得广泛使用的寥寥无几，譬如氯甲酸烷基酯，如今主要换成了氯甲酸异丁酯。

氯甲酸酯和羧基组分通过反应形成酸酐，两者的羰基相互竞争，氨解反应因为其亲电性和（或）空间位阻有了可供选择的区域。亲核试剂胺对氨基酸组分的羧基进行进攻可以在由氯甲酸烷基酯以及N保护的氨基酸羧酸盐形成混合酸酐时，使预期的肽衍生物形成，同时释放出游离酸形式的活性成分。在应用氯甲酸烷基酯时，不稳定的游离的单烷基碳酸，会立即分解形成相应的醇和二氧化碳。

混合酸酐主要通过二氯甲烷、四氢呋喃、二氧六环、乙腈、乙酸乙酯或DMF中分别溶解N保护的氨基酸或肽使用等当量的三级碱处理而形成。然后在－15℃-5℃温度下，剧烈搅拌，同时将氯甲酸烷基酯加入才能保证不对称酸酐（活化）形成。再将亲核性氨基酸组分在短暂的活化之后加入。如果想很容易地进行混合酸酐法，就要严格遵守上述的反应条件。

有些专家对于混合酸酐的稳定性，副产物氨基甲酸酯和消旋等方面的减少进行了深入研究，通过这一研究进一步的了解反应机理，并且提高了该方法的缩合效率。到目前为止，该方法得到了非常广泛的应用。通过研究产生过量氨基甲酸酯的原因，特别是在异亮氨酰基和缬氨酰基的情况下，如果三及碱使用N－甲基哌啶以及溶剂使用二氯甲烷，那么就可以使主要副反应得以避免。混合酸酐水解的稳定性比较高，所以水洗涤有机相可以使混合酸酐纯化。

在混合酸酐缩合法的实际应用中，需要注意以下几个方面：

尽管对于混合酸酐的形成和随后的缩合反应，含水的DMF可以算作一个好的溶剂，然而相比于使用四氢呋喃或卤化试剂为溶剂，它对于消旋的促进作用要高得多。

写到最后:

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