多肽填料粒径的大小和分布情况对多肽分离纯化有哪些影响？

填充柱的柱效、背压会受多肽色谱填料颗粒的粒径和分布情况所影响。小粒径色谱填料的价格相对来说会高一些，填料粒径小不仅会导致填充柱的柱效高还会导致柱压变高，若要提高分离度，必须要在相同的条件下提高柱效。填料粒径小还会对色谱系统要求高，设备投资大。

基于以上原因，多肽色谱填料的粒径大小不同，分离效率和成本也不同，所以通常粒径在10微米以上的多肽色谱填料颗粒应用于工业制备，粒径在3-5微米之间的填料用于常规HPLC，2微米以下的色谱填料常用于UPLC。

同样，色谱填料的粒径分布情况对高效液相色谱分离过程也有一定的影响，是色谱填料性能的重要参数。当填料颗粒粒径的大小统一、在填充柱床上分布紧密程度的不统一，粒状填料间的间隙流动通路不一样，便会导致填充柱内的路径不统一从而产生多路径效应。填充柱床上面的溶质分子的流动路径和保留时间各不相同，导致色谱峰变宽，影响溶质分子分离结果。

当相同的溶质分子流过色谱柱时，若色谱微球填料粒径分布不均，就会在填充柱床内产生不同的通路，导致经过的路径长短不同，色谱峰变宽，塔板数变小，柱效降低。

想要有较好的溶质分子分离效果，必须要保证使用的色谱填料粒径、分布情况一致。这样会减少多路效应，使填充柱床上面的溶质分子的流动路径和保留时间一致，从而色谱峰变窄，理论塔板数升高，达到的柱效更高。

写到最后:

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