多肽切割有哪些操作规程?
发表时间:2022-06-22适用范围:多肽切割的操作过程
负责人:多肽组切割操作人员及QA
规程:
1. 切割准备工作
1.1. 搭建切割实验装置
将收缩抽干后的树脂倒入带盖的玻璃反应器中,搭建好机械搅拌装置
1.2. 配置好切割液(详见切割液配制标准操作规程)
2. 开始切割
将切割液倒入反应器,开启机械搅拌装置,搅拌2小时(机械搅拌装置的搭建使用详见无级调速搅拌器标准操作规程)
3. 过滤树脂
使用砂芯漏斗滤去树脂,用TFA将树脂洗涤3遍(洗涤用TFA的量为刚刚没过树脂即可,加入TFA后用刮刀搅拌后抽滤)
4. 析出多肽粗品
向50L塑料溶剂桶倒入乙醚(倒入乙醚的体积为切割液体积的10倍),边搅拌边向乙醚中倒入切割液。
5. 减压抽滤获得粗品
将多肽悬浮液用布氏漏斗抽滤,得到固体后,用乙醚洗涤多次直至滤出的乙醚无色透明,无明显的TFA味道为止。
6. 烘干和称量
将多肽用红外灯烘干,称出粗品重量,放冰箱保存
注意事项
1. 配制切割液或者取用切割液时动作必须缓慢,防止切割液飞溅
2. 机械搅拌速度不宜过快,防止树脂飞溅到液面以上,不参与反应
3. 过滤树脂时应用TFA洗涤反应器多次,直至反应器内无树脂残留,洗出的液体无色透明
4. 乙醚提前放入冰箱冷藏30分钟
5. 烘干多肽时注意多肽状态,若发现多肽吸潮,需重新用乙醚洗涤,重新烘干
6. 注意保存实验记录,实验现象,多肽粗品的颜色及重量
写到最后:
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