多肽合成的工作原理

      Fmoc 和 t Boc是现如今多肽合成的首要办法，由于 Fmoc 比 tBoc 具有更多的优势，因此让大家比较认可Fmoc 法。多肽合成是一个重复添加氨基酸的进程，合成方向是从 C 端（羧基端）向 N 端（氨基端）进行；从前多肽合成大多是在液相中进行，而如今大多选用固相合成，这会大大降低每步商品提纯的难度；合成柱和添加的氨基酸的侧链必须预先被维护且羧基端是游离的，制药在反响之前先用化学试剂活化它，就可以防止副反响的发作。

具体合成过程如下：

1、去维护：Fmoc 维护的柱子和单体有必要用一种碱性溶剂去除氨基的维护基团。

2、激活和交联：下一个氨基酸的羧基被一种激活剂所激活溶解，激活的单体与游离的氨基在交联剂的作用下交联，构成肽键。

3 、循环：这两步反响重复循环直到整条肽链合成结束。

4 、洗脱和脱维护：依据肽链所含的残基不一样，用不一样的脱树脂溶剂从柱上洗脱下来，其维护基团被一种脱维护剂洗脱和脱维护。

多肽是复杂的大分子，每条序列在物理和化学特性上都是相同的，有些多肽虽然合成相对简单，但纯化艰难；最常见的疑问是很多肽不溶于水溶液，在纯化中，这些疏水肽必须溶于非水溶剂中或特别的缓冲液，但这些溶剂或缓冲液可能不适合应用于生物试验体系，导致研究人员无法运用该多肽达到自己的意图，建议可以通过下降肽链合成的难度和增强肽链的可溶性来改善此现象。

一、下降肽链合成的难度

1.削减序列长度

在很多试验中，下降残基数低于20 往往能得到非常好的试验成果，因为肽的长度添加会致使粗产品纯度下降，当肽链长度添加到20个残基以上时，就不会简单得到较高纯度的初产品。

2.削减疏水性残基数

疏水性残基占据优势的肽，在距C端7-12个残基的区域会导致合成艰难。一般是因为合成中构成b折叠片从而发生不完全配对。用1个或几个极性残基置换 或参加Gly或Pro以翻开肽构造会有帮助。

3.削减“艰难”残基

有多个Cys 、Met 、Arg 、Try 残基一般难于合成。Ser一般可作为Cys的非氧化更换。

二、增强肽链的可溶性

1、改动N端或C端

关于酸性肽可推荐乙酰化以添加负电荷，对于碱性肽推荐氨基化以添加正电荷。

2、缩短或加长序列

某些序列富含很多疏水氨基酸，如Trp 、Phe、Val、Ile 、Tyr 和 Ala等 ，当它们大于50%一般难于溶解。加长序列或通过削减疏水残基的办法下降肽链的长度都可以加肽的极性，肽链极性越高越溶于水。

3、参加可溶性残基

关于某些肽链而言，加上一些极性氨基酸能改进可溶性。例如给酸性肽的N端或C端加上Glu-Glu；给碱性肽的N端或C端加上Lys-Lys。但是肽链两头不能改动时，该办法不可行。

4、通过置换一个或多个残基改动序列

改动序列内某些残基可以改进肽链的可溶性。一般单个残基的更换能够明显改进其疏水性，而这种改动一般是较为保存的，如用Gly替代Ala 。

写到最后:

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